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流感病毒研究中磁珠的应用

来源:火狐体育首页网址 作者:火狐体育电脑版网址 ;发布时间:2022-05-28 09:21:17   点击量:2215

  每年流感疫情的爆发给公共安全造成巨大的威胁。一直以来,能够应对新出现的流感病毒的疫苗都处于短缺状态。为解决这一问题,结合诱导交叉保护抗体反应的保守抗原与激活交叉保护T细胞反应的表位是可采取的策略之一。

  中国科学院沈阳应用生态研究所徐明恺团队在eLife上发表的文章介绍了一个包含流感病毒保守表位和超抗原的重组蛋白诱导广谱保护。在这次研究中,研究者设计构建了一种名叫NMHC的重组蛋白,这种蛋白包含了流感病毒的保守性表位和超级抗原片段。

  NMHC重组蛋白由核蛋白NP(一种流感病毒的保守内部抗原),基质蛋白2外域M2e(一种在甲型流感病株内高度保守的多肽),血凝素茎区HA2上高度保守的α螺旋结构和SEC2(用于强化抗原性的细菌超抗原葡萄球菌肠毒素C2)组成。研究者用BeaverBeadsProteinA/G抗体纯化试剂盒,对血清中抗体进行纯化,纯化后的抗体与NMH形成稳定络合物的能力,后续通过pull-down实验来确认:将抗体与NMH孵育,用BeaverBeadsProteinA/G磁珠拉下NMH。分离上清,洗脱并中和磁珠上的抗体后,用SDS-PAGE分析结合与未结合上的抗体比例。

  研究结果显示,重组蛋白NMHC促进了B细胞和T细胞的对流感病毒感染的免疫反应。NMHC的SEC2端促进了树状细胞的成熟,成熟的树状细胞将NMH端的抗原呈现给CD4+T细胞和CD8+T细胞。这一过程促进了CD4+T细胞和CD8+T细胞的活化,增殖和分化。因此,研究者提议将NMHC作为预防多种流感的通用型疫苗备选。

  BeaverBeads Protein A/G 为纳米级磁性微球,适用于血浆、腹水、组织培养上清液等样品中的抗体纯化,也可以用于抗体固定及其它研究,其优势:

  配合磁性分离器,可在10min内完成抗体吸附过程,30min内完成抗体纯化流程,大幅度缩短抗体纯化所需的时间。此外,配合预制缓冲液,为抗体纯化实验提供了最佳的反应条件,提高了抗体纯化实验的稳定性。

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